眾所周知，銅離子具有強大的廣譜抑菌、殺菌作用，在各行各業(yè)中被廣泛應用。在養殖生產(chǎn)業(yè)中，銅作為飼料添加劑被添加在動(dòng)物飼料中，主要分為有機銅和無(wú)機銅。本試驗通過(guò)測定硫酸銅、甘氨酸銅、堿式氯化銅的體外最小抑菌濃度，用以比較三種銅的體外抑菌效果。

  材料與方法  

  1、試驗材料

  ? 硫酸銅（銅含量25.1%）、甘氨酸銅（銅含量23.18%）、堿式氯化銅（銅含量58.82%）均取自吉隆達生物科技集團有限公司。

  ? 大腸埃希氏菌（CICC10003）購自中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心。

  ? 培養基：LB液體培養基。

  2、試驗方法

  2.1、LB液體培養基的配制

  分別稱(chēng)取胰蛋白胨1 g，氯化鈉1 g，酵母粉0.5 g，加入超純水100 ml，121℃滅菌。

  2.2、試管二倍梯度稀釋法測最小抑菌濃度

  樣品經(jīng)二倍稀釋法處理后，取樣液1ml備用；同時(shí)，另外準備兩支試管作對照，分別加入1 ml 95%酒精和1 ml LB液體培養基。每支試管中加入1 ml LB液體培養基和100 μl菌液，放入37℃恒溫培養箱培養16 h，按照試管編號，最后一支澄清試管中的樣品濃度為最小抑菌濃度，每個(gè)樣品設置2平行。

  結果與分析

  由圖1、2可知：本試驗中，甘氨酸銅、硫酸銅、堿式氯化銅對大腸埃希氏菌的體外最小抑菌濃度分別為0.0058%、0.0063%、0.1765%，最小抑菌濃度值比較為：甘氨酸銅＜硫酸銅＜堿式氯化銅。

圖1 三種添加劑的最小抑菌濃度

圖2 最小抑菌濃度實(shí)驗部分現場(chǎng)圖

  本實(shí)驗結果表明：甘氨酸銅的體外抑菌能力最好，其次是硫酸銅，最后是堿式氯化銅。

  討論

  最小抑菌濃度通常指抑制微生物生長(cháng)的最低濃度。研究表明：銅抑菌的主要由于溶解出的銅離子，可穿過(guò)細菌細胞膜，破壞蛋白質(zhì)和細胞合成酶活性，使細菌喪失分裂增殖能力而死亡；其次，銅離子可在光作用下，激活空氣和水中的氧，產(chǎn)生的H2O2具有強氧化還原作用，能夠有效起到抑菌、殺菌作用。

  本試驗中，硫酸銅、甘氨酸銅、堿式氯化銅均表現出良好的抑菌效果，而堿式氯化銅的體外抑菌效果比硫酸銅和甘氨酸銅差，可能是因為堿式氯化銅不溶于水，溶解出的銅離子較少，體外抑菌能力較弱。

  結論

  本試驗中，硫酸銅、甘氨酸銅、堿式氯化銅飼料添加劑均表現出良好的抑菌效果，其中甘氨酸銅的體外抑菌效果最佳。

  展望

  本試驗為體外抑菌試驗，間接的說(shuō)明了銅離子是抑菌的主效因子，不同的有機配體（本文為甘氨酸）可能對銅離子抑菌有協(xié)同作用。我們建議下一步采用動(dòng)物試驗，考察不同劑型、不同銅劑量對動(dòng)物腸道微生物區系的影響以解決選用何種銅源更環(huán)保、更經(jīng)濟。

  四川吉隆達生物科技集團有限公司，在全球擁有近2000家客戶(hù)，產(chǎn)品覆蓋30多個(gè)國家和地區。涉及添加劑飼料，生物飼料添加劑，蛋雞飼料添加劑，市場(chǎng)占有率達20%。