材料與方法

1.1 主要試劑

  ? 酸吉靈（酸化劑，主要成分為苯甲酸）取自吉隆達生物科技集團有限公司；

  ? 指示菌：金黃色葡萄球菌（CICC10001）、大腸埃希氏菌（CICC10003）購自中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心；

  ? 營(yíng)養瓊脂、瓊脂。

1.2 主要儀器

  牛津杯（7.78 mm）、霉菌培養箱、高壓滅菌鍋、水浴恒溫振蕩器、紫外分光光度計、游標卡尺

試驗方法

2.1 指示菌的活化

  指示菌經(jīng)37℃、180r/min搖床培養活化后，使用紫外可見(jiàn)光分光光度計測量OD值，當OD值在0.50左右時(shí)停止培養。

2.2 試驗設計

  如表1所示，將酸吉靈用去甲醇溶解，配成濃度分別為2.00%、1.00%、0.50%、0.25%的4種的溶液備用。按照2.2所述的試驗方法進(jìn)行抑菌試驗。每個(gè)處理濃度設3平行。

表1 試驗設計

2.3 牛津杯雙層板法測抑菌直徑

  在已滅菌的培養皿上倒一層薄瓊脂液，待瓊脂凝固后，每個(gè)平板中放置3個(gè)牛津杯，倒入15 ml含菌營(yíng)養瓊脂。待培養基凝固之后用鑷子取出牛津杯，并做好標記，在小孔中分別加入100 μl樣液（對照組選用無(wú)菌水）。加樣完成后，靜置1 h后放37℃培養箱培養。待抑菌圈形成后，用游標卡尺測量抑菌圈直徑并記錄數據，讀數精確至0.001 mm。

結果與分析

  不同濃度酸吉靈對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的體外抑菌圈大小如表2所示。酸吉靈的體外抑菌圈直徑隨濃度的降低變小，抑菌能力也隨之減弱。由圖1可知，酸吉靈對大腸桿菌的體外抑菌能力略?xún)?yōu)于對金黃色葡萄球菌的體外抑菌能力。

表2 酸吉靈體外抑菌直徑均值/mm

圖1 酸吉靈體外抑菌直徑/mm

討論

  金黃色葡萄球菌和大腸埃希氏菌是比較常見(jiàn)的致病菌，能夠引起畜禽多種腸道問(wèn)題和疾病。

  本試驗中，牛津杯周?chē)霈F明顯的抑菌圈，表明酸吉靈對大腸埃希氏菌和金黃色葡萄球菌有明顯抑制作用，抑菌圈直徑越大，表明抑菌能力越強。

  酸吉靈是一種固體有機酸化劑，其主要成分為苯甲酸。苯甲酸分子可改變細菌細胞膜通透性，進(jìn)入細胞中，改變胞內pH，抑制細胞基礎代謝反應，破壞胞內蛋白質(zhì)，抑制細胞內呼吸酶系統和電子傳遞酶系統的活性，從而達到達到抑菌和殺菌作用。

  許多研究表明，苯甲酸有良好的的抑菌效果，并且對大多數微生物均有抑制作用，與本試驗結果相符合。

結論

  本試驗結果表明，酸吉靈是一種抑菌效果優(yōu)良的有機酸化劑。

展望

  苯甲酸在體外可以馬尿酸的形式隨尿液排出體外，不在體內蓄積，并且有文獻表明，苯甲酸在動(dòng)物日糧中添加，可調節腸道菌群結構、降低腹瀉率、改善飼料的轉化率，提高生長(cháng)性能。因此酸吉靈是一種安全綠色的功能型酸化劑，抑菌效果優(yōu)良，可展開(kāi)動(dòng)物實(shí)驗加以驗證，并進(jìn)行推廣使用。

圖2牛津杯

圖3 抑菌圈圖（試驗現場(chǎng)部分圖）

  四川吉隆達生物科技集團有限公司，在全球擁有近2000家客戶(hù)，產(chǎn)品覆蓋30多個(gè)國家和地區。涉及添加劑飼料，生物飼料添加劑，蛋雞飼料添加劑，市場(chǎng)占有率達20%。